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          聚乙烯亞胺PEI轉染試劑

          簡要描述:CHO高效瞬時轉染試劑,PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉染試劑。

          • 產品型號:型號齊全
          • 廠商性質:代理商
          • 更新時間:2023-07-08
          • 訪  問  量:2936
          詳情介紹

          產品名稱:聚乙烯亞胺PEI轉染試劑

          產品簡介:
          聚乙烯亞胺PEI轉染試劑(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進入細胞。PEI Prime是一種高性能轉染試劑,利用PEI的特性旨在實現高產量,可重復性和可擴展的瞬時基因表達。


          應用范圍:

          PEI轉染試劑能夠高效率轉染多種細胞系,包括貼壁細胞和懸浮細胞。此外,PEI是用于HEK293和CHO懸浮細胞轉染的試劑。PEI轉染試劑是生產任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。



          PEI線性轉染試劑產品優勢:

          1. 低毒,高效

          2. 操作簡單,高性價比

          3. 可提供可靠、具有可重復性的轉染結果

          4. 適用于快速、高通量轉染流程


          轉染步驟:

          -以HEK293貼壁細胞為例,步驟如下:

          1. 細胞接種:細胞密度2-6 x106 cells/mL。

          2. 質粒的準備:在5%最終培養體積的DMEM或培養基中,每106個細胞稀釋1.0 ug pDNA。

          3. PEI的準備:在5%最終培養體積的DMEM或培養基中,每106個細胞稀釋3.0 ug PEI Prime,混勻。

          4. 通過快速,短暫渦旋或顛倒數次試管,將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

          5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

          6. 一邊旋轉板,一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細胞中。

          7. 于37℃ CO2培養箱中培養。




          轉染的優化:

          為達到高轉染效率和低細胞毒性的理想結果,可以進行如下優化:

          參數

          范圍

          PEI濃度

          3.50-6.50mg/(L final culture)

          DNA濃度

          0.75-1.5mg/(L final culture)

          PEI/DNA混勻時間

          5.0-15.0minutes


          與市場同類品牌的PEI轉染效率的對比:

          使用PEI Prime(PEI:DNA濃度比3:1)或某國外品牌PEI,用CMV-SEAP質粒轉染20ml 含HEK293懸浮細胞的培養物。 轉染后5天,使用磷酸酶報告染料和UV / Vis檢測SEAP表達水平。數據表示占某國外品牌PEI的SEAP表達水平的百分比。結果顯示我們的PEI Prime 的轉染效率比國外同類廠家高出40%。


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