免費(fèi)咨詢熱線:
          技術(shù)文章
          首頁(yè) > 技術(shù)中心 > PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的使用可有什么要領(lǐng)

          PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的使用可有什么要領(lǐng)

           更新時(shí)間:2022-07-20 點(diǎn)擊量:1418
           
            PEI線性轉(zhuǎn)染試劑是由一種陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,分子量40000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣泛適。該試劑可在含血清與抗生素的*培養(yǎng)基中發(fā)揮作用,即使在有血清存在的情況下,它仍然能高效的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,對(duì)大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞都有較高的轉(zhuǎn)染效率(用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等),并且細(xì)胞毒性較低。
            PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的注意事項(xiàng):
            1、質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高純度無(wú)內(nèi)毒素轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。
            2、細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保細(xì)胞沒(méi)有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。
            3、細(xì)胞培養(yǎng)液要求:PEI線性轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染,并且轉(zhuǎn)染前不需要換培養(yǎng)基。但是制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑,因?yàn)檠鍟?huì)影響復(fù)合物的形成。確保細(xì)胞培養(yǎng)液沒(méi)有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。轉(zhuǎn)染時(shí)培養(yǎng)液中不添加抗生素。
            4、DNA濃度和PEI轉(zhuǎn)染試劑量的優(yōu)化:DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響,初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑量以得到大的轉(zhuǎn)染效率。使用者可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例,通常推薦是1:2~1:5。
          最近高清中文在线字幕在线观看| 日韩综合无码一区二区| 无码任你躁久久久久久老妇App| 亚洲中文字幕无码中文字在线 | 波多野42部无码喷潮在线 | 久久精品中文无码资源站| 伊人久久无码中文字幕| 久久精品无码一区二区app| 国产成人亚洲综合无码| 无码中文字幕日韩专区 | 曰韩无码AV片免费播放不卡| 蜜桃视频无码区在线观看| 最好看最新的中文字幕免费| 亚洲日本中文字幕区| 久久精品?ⅴ无码中文字幕| 无码中文字幕日韩专区| 精品无码久久久久国产| 中文字幕51日韩视频| 亚洲精品国产日韩无码AV永久免费网 | 午夜无码视频一区二区三区| 亚洲成在人线在线播放无码| 久久亚洲精品无码aⅴ大香| 亚洲国产精品无码久久久不卡| 久久AV高潮AV无码AV| 中文字幕无码av激情不卡久久| 无码视频一区二区三区在线观看| 国产午夜片无码区在线播放| 亚洲日本中文字幕天天更新| 国产成人一区二区三中文| 人妻无码中文字幕免费视频蜜桃| 久久综合一区二区无码| 日日摸日日踫夜夜爽无码| 中文字幕精品无码一区二区 | 欧美日韩中文国产一区| 日韩经典精品无码一区| 精品无码一区二区三区爱欲| 午夜无码伦费影视在线观看| 无码H黄肉动漫在线观看网站| 日本免费在线中文字幕| 乱人伦中文视频在线| 日本妇人成熟免费中文字幕|